Multiplication du phalaenopsis... Par fécondation

je vois pas a quoi il sert le coton mais c'est pas grave

sinon tu as acheter un saint paulia aussi ? je suis sur que tu la oublier lol

d'après ce que j'ai compris le coton sert à laisser respirer le milieu (puisque le bouchon est troué je le rappelle et c'est là que l'on met le coton) tout en empêchant les bactéries de rentrer. Par contre pourquoi doit il être brut? cela me laisse perplexe. Peut-être que le coton peigné laisse passer les bactéries?

Et non perdu je n'ai pas oublié le saint paulia! j'en ai acheté un en allant faire les soldes à Truff (au rayon orchidée bien sûr...) J'ai donc un saint paulia à décapiter (quand même pas je vais "juste" lui enlever 5 feuilles ou qqch comme ça). Je sens que je vais être envahie de St Paulia avec tous ceux que j'ai déjà...

ahh oui c'est vrai j'avais oublié qu'il y avait un troue dans le couvercle

pour les saint paulia tu risque d'en avoir un certain nombre si j'en croit mes livre de production florale et mon cour

1 feuille = 5 tronçons de pétiole (la il utilse le petiole et non la feuille )
~ 5X12 bourgeon
= 60 plants au bout de 6/8 semaines

a partir d'un feuille de saint paulia au peut obtenir 7 millions de plantes en CIV identique au pied mére

AAAAAAAAAAAAARRRRRRRRRRRGHHHHHHHH!!!!!

bon et bien disons que je ferais fortune en les revendant

lol , sa se vent plus le saint paulia c'est plus a la mode

alors des nouvelles ?

alors, je n'ai toujours pas de coton non cardé et ce tjs pour les mêmes raisons que la dernière fois... mais si la rupture de stock se prolonge trop j'utilisrai des boîtes de pétri. Après sinon il me manque une pissette mais ça j'irai l'acheter bientôt normalement. Dernier petit problème mais qui ne s'achète pas: il me faut du temps !! pour réviser un peu tout ça et bien sûr pour faire la manip elle-même. Et ça c'est vraiment très dur à trouver!

Ça discute sec en MP, et je remercie Sophie.pau de me motiver en me trouvant des liens afin de semer mes graines. Mais bon, c'est plutôt pas facile, je suis plutôt fainéant, pas solitaire pour deux sous donc…
Sophie, je me permets de donner le dernier lien que tu viens de m'envoyer :
http://www.aaoe.fr/post/2006/11/17/La-culture-in-vitro

Pas mal, la bidouille pour avoir de l'air stérile est géniale !!!

Les filles, vos graines partent tout à l'heure, et bonne chance hein ! Je vous envie d'avoir ce courage, dommage que vous soyez si loin, je serai bien venu "superviser" les opérations

Bonjour!
Merci à Mr Happy j'ai reçu les graines hier!(je t'ai envoyé des MP qui restent dans ma boîte d'envoi donc je passe sur le forum...) tu as été généreux dis donc, si avec tout ça il n'y en a aucun qui survit je crois que je vais
J'ai été étonnée par la taille de tes graines, comme Sophie.pau d'ailleurs, je croyait que c'était toutes les orchidées qui avaient des graines microscopiques! là au moins je ne m'arracherai pas les cheveux à les chercher au fin fond de mes tubes à essai... et la stérélisation sera plus facile.
...et oui je mettrai des PHOTOS!! en plus je crois que l'on peut voir des modifs en seulement 12h ça promet !

Suis désolé les filles, j'ai complètement oublié de vous prévenir. La vie file vite en ce moment, et j'oublie beaucoup trop de choses (en tout cas, pas de bisouiller ma marmaille ).
Je vais voir les MP…

En ce qui concerne les graines, j'espère sincèrement que ce sont des graines d'orchidées, que je ne me suis pas fait avoir ! Mais le pépinièriste ne faisait QUE des orchidées et pour les autres, c'était au jardin botanique de Dalat. Donc…

J'ai une bonne nouvelle à annoncer: pour moi la culture in vitro ça a commencé aujourd'hui! comme prévu je me fait la main sur les saints paulia et j'ai constitué les milieux de culture aujourd'hui (enfin ce soir c'est pour ça que je finirai demain.)
On dit que la première expérience n'est pas facile mais je confirme! rien que pour cette première partie j'ai cumulé les catastrophes
Petit récapitulatif des bêtises:
-Tout d'abord dans la phase où l'on est sensé ajouter l'eau distillée au milieu de culture en poudre: il ne faut pas hésiter à chauffer, la constitution du milieu doit se faire au bain marie bouillonnant. Ma 1ère erreur a justement consisté à chauffer à feu tout doux (ben oui j'avais peur que les éléments nutritifs ne soient détruits!), puis a verser au bout d'un certain temps dans les contenants le milieu pas prêt (il me semblait qu'il était limpide... mais non). Mais je ne me rends compte que ce n'est pas bon seulement après avoir tout versé dans mes boîtes de pétri et mes pots de confiture car il se forme deux phases bien distinctes: une aqueuse et l'autre aves tout les éléments non mélangés! Je décide donc de tout remettre dans la casserole et je fais refais chauffer mais cette fois ci à feu très vif. Ensuite je remet le milieu (vraiment limpide cette fois!) dans les récipients utilisées précédemment et où il restait des résidus de poudre... il faut donc espérer que le tout se sera mélangé dans la phase stérilisation à la marmite car je ne vois pas vraiment si c'est OK.
Après cette première erreur j'en commet une autre qui est d'avoir mis les boîtes de pétri dans la cocotte minute: après les 30 minutes de stérilisation il est ressortit... un amas de plastique! Heureusement que j'avais aussi mis des pots de confiture qui ont, eux, résisté!

quelques conseils à retenir:
-ne pas tenter de séparer le milieu de culture en deux parties car il est constitué d'une multitulde de petits éléments qui ne seraient ainsi pas répartis correctement! (j'ai perdu 30min en voulant faire ça et me suis rendu compte de moin erreur une fois que c'était soigneusement divisé! )
-ne pas mettre de récipients en plastique dans la cocotte minute sinon vous vous retrouverez avec un tas de plastique comme moi!
-ne pas hésiter à bien chauffer le milieu pour la mise en flacon mais faire attention tout de même! il faut que le milieu soit limpide comme un verre d'eau, si c'est blanchâtre ou un peu opaque ce n'est pas la peine d'arrêter de chauffer.
-pour l'autoclave, les récipients seront disposés sur le panier de la cocotte car le milieu ne doit pas bouillir, c'est impératif! sinon le milieu aurait des éléments nutritifs détruits.

Voilà c'est une petite mise en bouche la suite pour demain! avec la suite de l'expérience et les photos bien sûr

suis impatiente de voir tout çà et courage édelweiss31

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Claude51
"L'ignorant affirme, le savant écoute, le sage réfléchit"
Modératrice qui a démissionné

Merci claude51!

Eh bien voilà c'est fait!
Cette deuxième partie a consisté à désinfecter mes végétaux et à les insérer dans mes bocaux stériles préparés préalablement.
Tout d'abord désinfection de la table de travail à l'eau de javel et désinfection aussi à l'eau de javel des boîtes de pétri qui me serviront après pour découper mes feuilles de St paulia. J'installe tout le matériel:
à droite, un bécher contenant scalpel et pince
à gauche,au second plan : les bocaux contenant les milieux
au premier plan : 2 grandes boîtes de pétri: une avec un mouillant composé d'eau distilllée et de liquide vaisselle et l'autre contenant l'eau de javel à laquelle j'ai rajouté un peu d'eau distillée.
au milieu, la lampe à alcool entourée de 4 boîtes de pétri, qui seront par la suite remplies d'eau distillée stérile afin de rincer les feuilles passées dans les désinfectants.

Tout d'abord, en milieu non stérile (je ne travaille pas autour de la flamme) je commence la désinfection de mes feuilles par le trempage dans le mouillant: un passage de 5 minutes
Ensuite je transfère les feuilles dans le désinfectant composé d'eau de javel par passage de 12 minutes. Là je prend le temps de découper mes feuilles en petits morceaux.
Après cette étape il est nécessaire de travailler en condition stériles: je rapproche donc ma boîte de pétri de la flamme et commence le premier bain de rinçage qui dure 5 minutes. Je précise qu'il est nécessaire de bien stériliser les instruments de travail, pour cela tremper dans l'alcool à 70° et passer à la flamme. Tous les bains de rinçage durent 5 minutes. J'ai un problème qui se pose au bout du 2ème bain: Plus assez de mèche pour la lampe à alcool dont la flamme s'éteint! Je vais donc chercher en catastrophe des bougies que je dispose autour des boîtes de pétri. A ce stade je travaille aussi vite que possible car il est évident que les conditions de stérilité ne sont guère respectées. Je conserve deux bougies placées l'une à côté de l'autre et j'ouvre mes bocaux en dirigeant l'ouverture vers la flamme.
Comme vous pouvez le constater sur la photo ce n'est pas particulièrement pratique... et je manque de me brûler plusieurs fois! Vu que la flamme des bougies est plutôt petite je suppose que des bactéries sont venues s'installer dans le pot et certaines feuilles risquent de ne pas se développer (pas toutes j'espère quand même!)

Leçon à retenir:
-Vu les problèmes rencontrés ci-dessus il est certain que de s'entraîner avant de faire la manipulation maîtresse est très fortement conseillé! plusieurs imprévus s'ajoutent (par exemple la flamme qui s'éteint en pleine manip') et tant que la première fois n'est pas passée on ne sait pas trop à quoi s'attendre!
- Utiliser un bec bunsen est à mon avis bcp plus pratique que la lampe à alcool dont la mèche se consomme très vite et qui, en plus, ne produit pas une flamme très puissante

la suite des photos de la manip...